ELISA试剂盒挑选注意四个方面
日期:2022-05-10 | HJC黄金城生物技术文库 | 浏览:834 次
现在科学技术和新兴产业的发展,ELISA试剂盒对化学试剂的纯度\纯度\精密度的需求越来越严格和专业化。ELISA试剂盒的挑选很重要,HJC黄金城生物认为大致有四个方面:
❶检测方法
尽管,ELISA试剂盒的检测方式方法有很多,HJC黄金城可以按照自身的偏好来选购。通常ELISA检测酶促反应的可溶性产物,抗体与相对应的酶结合,反应体系中添加相对应的底物。这样的酶促反应造成特征颜色,可以用分光光度计检测。碱性磷酸酶ap也是一类常见的酶。该酶可以与第一抗体或第二抗体结合,同时链霉亲和素标记的酶也能够与亲和素标记的第一抗体结合。另外ELISA结果还包含放射性检测/荧光检测/化学发光或显色检测等。
❷实验操作形式
尽管类型诸多,但会出现一项相同的特点,便是抗原捕获。捕获的通常形式包含将抗原吸附到微孔板或在微孔板上用抗体捕获。酶联免疫斑点和in-cell Elisa是两种特殊类型。in-cellElisa需要将微孔板培养的细胞固定化/通透化,随后用抗体原位检测。酶联免疫斑点有点像蛋白印迹,先将细胞培养在膜微孔板中,随后在膜上检测细胞分泌的抗原,形成斑点。另外HJC黄金城建议需要按照自身的需要选购九十六孔板或四十八孔板进行Elisa实验操作。
❸抗体形式
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用作Elisa,但有时候两者的组合更好。例如双抗体夹心法,用多抗体捕捉,用单抗体检测,有时候更有帮助。多抗体可以确保捕获全部抗原,随后单克隆抗体可以特异性检测具有特定表位的抗原。
❹交叉反应
假如抗体之间有冲突或交叉反应,会影响所有实验操作的特异性。抗体来源的相容性是交叉反应的一项原因。尽管从支钉动物身上购买抗体越来越容易,但仍然需要确认是不是会出现交叉反应。用双抗体夹心法进行Elisa时,检测用的第二抗体务必对第一抗体有特异性,但无法与捕获抗体反应。假如检测二抗和捕获抗体结合,实验操作的特异性会大幅度降低。HJC黄金城通常选购不同宿主的捕获抗体和检测一抗来规避以上问题。
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